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    moc1 美国特殊渠道绝对
    moc1 美国特殊渠道绝对
    价格:¥询价
    货期:1周
    编号:BRCC-007-0191
    品牌:BRCC®

    活化细胞
    冻存细胞
    荧光标记细胞

    规格:
    T25瓶
    冻存管

      产品名称moc1 美国特殊渠道绝对
      商品货号BRCC-007-0191
      中文名称口腔鳞状细胞癌
      组织来源 国外
      形态特征 形态:淋巴母多角形细胞样,贴壁+悬浮生长。用途:仅供科研使用
      特征特性口腔鳞状细胞癌(OSCC) 是头颈癌的一个突出子集,头颈癌是全球第六大常见癌症。发生 OSCC 的主要危险因素是致癌物暴露,将头颈癌的这一亚群与人瘤病毒诱导的头颈癌区分开来。尽管在检测、手术、化疗和放疗方面取得了进展,但 OSCC 的预后几十年来一直保持稳定。此外,在诊断时,大约三分之二的OSCC患者患有局部晚期疾病,导致发病率和死亡率增加。 www.kerafast.com/productgroup/875/mouse-oral-squamous-cell-carcinoma-oscc-cell-li
      细胞污染
      培养条件 IMDM:F10-F12=2:1+10%FBS+5mg-ml胰岛素+20ug-500ml氢化可的松+2.5ug-500mlEGF+1%PS
      传代方法 500ML完全培养基:IMDM:F10/F12=2:1(313ml:157ml)培养基+FBS 10%(50ml)+2.5mg/500ml 胰岛素+20ug/500ml 氢化可的松+2.5ug/500ml EGF+ P/S 1% 双抗,1%。 2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
      细胞冻存步骤 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 
      复苏细胞步骤 MOC1细胞活性特别高,增值速度非常快,不建议传代密度太大,而选择稀一点重铺,等长满80%左右传代的时候,很难消化下来,建议加入0.25%EDTA的胰酶进去后充分混匀所有细胞都接触到胰酶,放置到培养箱进行消化,时长大约是3-4分钟左右后拿出来,在培养器皿的侧边进行拍打帮助细胞脱落,拍打过程大约持续2分钟左右才会脱落大部分细胞,如果脱落比例还不是很多,也可以重新放回培养箱继续消化1-2分钟后再次拿出来进行拍打脱落,等80-90%细胞都脱落后再终止消化,离心重悬再重新铺瓶,分散均匀。

      MOC2细胞贴壁性和常规细胞类似没有特别牢固。倍增周期也没有MOC1快。采用常规消化方法处理。

      贴壁细胞参考:

      1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

      2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

      3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

      3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

      4)运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

      悬浮细胞参考:

      悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶
      细胞传代步骤 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
      冻存条件 
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