| 产品名称 | E.G7-OVA 小鼠T淋巴瘤细胞 |
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| 商品货号 | BRCC-001-0136 |
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| 中文名称 | 小鼠T淋巴瘤细胞 |
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| 组织来源 | 国家资源库 |
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| 形态特征 | 形态：淋巴母细胞，悬浮生长
用途：仅供科研使用。 |
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| 特征特性 | 来源于C57BL / 6（H-2 b）小鼠淋巴瘤细胞系EL4（见BCRC 60179），EL4细胞通过电穿孔转染质粒pAc-neo-OVA，质粒pAc-neo-OVA携带鸡卵清蛋白（OVA）mRNA和新霉素（G418）抗性基因的完整拷贝;E.G7-OVA细胞含有插入质粒的单个拷贝，并组成性地合成和分泌OVA;用E.G57-OVA细胞免疫的C6BL / 7小鼠产生对OVA 2-258肽特异性的H-276 Kb限制性细胞毒性淋巴细胞;该细胞系是研究小鼠细胞毒性T淋巴细胞主要组织相容性复合体（MHC）I类限制反 |
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| 细胞污染 | |
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| 培养条件 | 1）准备1640培养基（推荐BasMed-AW-002）与2 mM L-谷氨酰胺调整为含有1.5 g / L碳酸氢钠，4.5 g / L葡萄糖，10 mM HEPES和1.0 mM丙酮酸钠，并添加0.05 mM 2-巯基乙醇和0.4 mg / ml G418，90%;胎牛血清，10%。 2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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| 传代方法 | |
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| 细胞冻存步骤 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 复苏细胞步骤 | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
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| 细胞传代步骤 | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 |
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| 冻存条件 | 低温：1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
常温: T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
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