产品名称 | SNU-1 人胃癌细胞 |
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商品货号 | BRCC-002-0008 |
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中文名称 | 人胃癌细胞 |
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组织来源 | |
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形态特征 | 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠 |
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特征特性 | 来源于一位44岁亚洲男性,1984年J. Park与同事从在细胞毒性治疗前取出的低分化原位胃癌中建立了SNU-1。 L-多巴脱羧酶(DDC)阴性。VIP受体阳性,但胃受体缺失。没有注意到存在 N-myc, L-myc, myb 和 EGF受体基因的扩增或重排的证据。细胞表达的c-myc和 c-erb-B-2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 及胃泌素释放肽。 https://www.atcc.org/products/crl-5971 |
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细胞污染 | |
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培养条件 | 形态:上皮样,悬浮生长。用途:仅供科研使用。 |
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传代方法 | 注意:可以通过添加新鲜培养基或更换培养基来维持培养。或者,可以通过将悬浮液离心并随后重悬于新鲜培养基中来建立培养物。随着细胞密度的增加添加培养基。 贴壁细胞参考: 一.消毒静置等细胞稳定后拍照100X和200X。弃去培养上清,用PBS润洗细胞1-2次并吸走。 二. T25瓶加入0.25%EDTA胰蛋白酶1-2ml于培养瓶中震荡混匀,如果属于贴壁不牢固的细胞很容易脱落的就培养箱外面消化震荡待脱落90%以上终止消化,一般小于1分钟以内,甚至不加胰酶有部分贴壁非常不牢固的细胞也会自然震荡脱落。如果是贴壁牢 |
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细胞冻存步骤 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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复苏细胞步骤 | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
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细胞传代步骤 | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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冻存条件 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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