| 产品名称 | NAMALWA 人Burkitt＇s淋巴瘤细胞 |
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| 商品货号 | BRCC-400-0052 |
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| 中文名称 | 人t＇s淋巴瘤细胞人 |
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| 组织来源 | |
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| 形态特征 | 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长。用途：仅供科研使用。 |
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| 特征特性 | 1967 年由NB Finter博士建立于一名黑人3岁女孩的伯基特淋巴瘤患者中分离出的B 淋巴细胞。这些细胞含有EB病毒（EBV）基因组。核型：这是一种具有低二倍体染色体计数的人类细胞系。模态染色体数为44，发生在30%的细胞中。具有较高倍性细胞的比率为2.8%。12 到 14 条标记染色体是大多数细胞共有的。其中有ins（1;？）（Q11;？）， ins（3） （Q11Q29）， Del（3） （P12/13）， Der（6）T（3;6） （第21页;p25）、t（15q21q）和其他七到九个。正常 N |
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| 细胞污染 | |
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| 培养条件 | RPMI1640+7.5%FBS |
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| 传代方法 | 悬浮细胞参考： 大多数悬浮细胞对于环境比较敏感，建议一直维持高密度生长，一般情况下细胞密度维持在1×10 5到1×10 6个/mL（不同细胞对密度要求不同）。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中800-1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例（首次可以1:1分瓶）分到新T25瓶中，添加5-6ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:4的比例进行。大多数血液类相关的悬浮细胞受运输影响比较大，会出现一 |
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| 细胞冻存步骤 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 复苏细胞步骤 | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
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| 细胞传代步骤 | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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| 冻存条件 | 常温发货：收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-6小时后观察密度和状态并拍照2-3张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存足量种子后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。
干冰发货：常规细胞发货冻存管2只，复苏1只，另外一只备用，**个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况及时留存复苏照片通知销售处理售后问题。 |
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