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    Jurkat(cloneE6-1) 人T淋巴细胞白血细胞
    Jurkat(cloneE6-1) 人T淋巴细胞白血细胞
    价格:¥0
    货期:1周
    编号:BRCC-400-0075
    品牌:BRCC®

    活化细胞
    冻存细胞
    荧光标记细胞

    规格:
    T25瓶
    冻存管

      产品名称Jurkat(cloneE6-1) 人T淋巴细胞白血细胞
      商品货号BRCC-400-0075
      中文名称人急性T淋巴细胞白血病细胞
      组织来源国家资源库
      形态特征淋巴母细胞   悬浮生长

      用途:仅供科研使用。
      特征特性是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat 细胞系由 Schneider 等人从一名 14 岁男孩的外周血中建立,最初命名为 JM。在用佛波醇酯和凝集素或针对 T3 抗原的单克隆抗体刺激后,克隆 E6-1 细胞会产生大量的 IL-2(需要两种类型的刺激剂来诱导 IL-2 的产生。表达T细胞受体、CD3。 抗原表达: CD31 阳性 产物: 八因子; 整合唾液酸蛋白 (BSP) ; biglyan; decorrin ; villin 2 (ezrin) . 骨
      细胞污染
      培养条件1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠悬浮
      传代方法如果是细胞为稳定转染的细胞,随细胞传代次数的增加,其荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选,常规实验需求不是特别强度高的前10代左右无需筛选。初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%
      细胞冻存步骤待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  
      复苏细胞步骤将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
      细胞传代步骤如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
      冻存条件常温发货:收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-3小时后观察密度和状态拍照2-3张反馈给销售,密度达标就可以传代。前期传代比例1:2,等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管,另外一瓶继续传代,反复冻存2-3只后才扩增做实验,以防突发情况引起断种。

      干冰发货:常规细胞发货冻存管2只,复苏1只,另外一只备用,**个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个,均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知销售。
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