| 产品名称 | NCI-H520 人肺鳞癌细胞 |
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| 商品货号 | BRCC-400-0183 |
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| 中文名称 | 人肺腺鳞癌细胞 |
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| 组织来源 | 国家资源库 |
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| 形态特征 | 形态：上皮细胞样，贴壁生长
用途：仅供科研使用。 |
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| 特征特性 | AF Gazdar 及其同事于 1982 年从一名白人男性肺鳞状细胞癌患者的肺肿块样本中获得。核型：这是一种亚三倍体人类细胞系。模态染色体数为58，发生率为 30%。更高倍性的频率为 3.2%。所有细胞共有 30 多个标记染色体，在一些细胞中发现了另外 4 个。常见标记包括 1q+、t(1q8q)、2q+、der(16)t(3;16)(q21;q22)、der(19)t(13;19)(q21;q13) 和 der(5 )t(5;5)(p15pq13)。通常，每个单元格中有两个 der(5) 副本。正 |
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| 细胞污染 | |
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| 培养条件 | 1） 准备RPMI-1640（推荐BasMed-AW-002）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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| 传代方法 | |
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| 细胞冻存步骤 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 复苏细胞步骤 | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
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| 细胞传代步骤 | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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| 冻存条件 | 低温：（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
常温: （2） T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
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