| 产品名称 | UWB1.289 人BRCA1综合征卵巢癌细胞 |
|---|
| 商品货号 | BRCC-400-0270 |
|---|
| 中文名称 | 人卵巢癌细胞 |
|---|
| 组织来源 | |
|---|
| 形态特征 | 形态：表皮细胞样,贴壁生长。用途：仅供科研使用 |
|---|
| 特征特性 | UWB1.289细胞来源于患者42岁患乳腺癌患者，54岁患卵巢癌，56岁死亡。UWB1.289在外显子1内携带种系BRCA11突变，并具有野生型等位基因的缺失。UWB1.289 细胞对卵巢癌免疫表型特征蛋白（细胞角蛋白 7、钙视黄素和肾母细胞瘤蛋白）呈阳性，但对胃肠道上皮标志物细胞角蛋白 20 呈阴性（数据未显示）。UWB1.289细胞雌激素受体和孕激素受体阴性，并且未通过免疫组织化学确定的HER-2 / neu过表达（数据未显示）。与所研究的所有蛋白质的UWB1.289细胞系相比，患者原发性卵巢肿瘤的 |
|---|
| 细胞污染 | |
|---|
| 培养条件 | 1） 准备1640：MEGM(1:1)培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
|---|
| 传代方法 | 贴壁细胞参考： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液 |
|---|
| 细胞冻存步骤 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。博瑞生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
|---|
| 复苏细胞步骤 | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
|---|
| 细胞传代步骤 | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
|---|
| 冻存条件 | 常温发货：收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-3小时后观察密度和状态拍照2-3张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存2-3只后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。
干冰发货：常规细胞发货冻存管2只，复苏1只，另外一只备用，**个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知销售。 |
|---|
